реклама

Вопрос доктору
Вы можете задать вопрос на нашем сайте.


Врач

Сравнительная оценка различных методов диагностики урогенитального хламидиоза

Хламидийная инфекция является серьезной проблемой здравоохранения, что обусловлено ее повсеместным распространением и значительным влиянием на уровень здоровья населения. К настоящему времени специалисты ВОЗ ставят генитальный хламидиоз на второе место по распространенности среди заболеваний, передающихся половым путем (ЗППП). Чрезвычайную актуальность приобретает вопрос своевременности и полноты установления этиологического диагноза, поскольку данных анамнеза и/или клинического обследования в ряде случаев бывает недостаточно из-за характерных особенностей хламидийной инфекции (полиморфизма и изменчивости клинических проявлений, отсутствия патогномоничных симптомов, наличия латентных, бессимптомных форм).

В последнее время мы все чаще сталкиваемся с ситуациями, когда и традиционные, и новые, наиболее перспективные методы диагностики оказываются недостаточными или принципиально неприемлемыми. Степень достоверности различных методов диагностики является постоянным предметом обсуждения исследователей и клиницистов.

В Уральском НИИ дерматовенерологии и иммунопатологии в течение последних десяти лет проводится диагностика хламидиоза. Мы начинали с самого простого цитологического метода, заключающегося в обнаружении цитоплазматических включений, образуемых хламидиями в эпителиальных клетках при окрашивании мазков-отпечатков по Романовскому-Гимзе. Модифицируя способы окраски, удалось лишь сократить время исследования. Чувствительность метода по-прежнему оставалась низкой и не превышала 28% при исследовании соскобных препаратов у больных ЗППП. Нами отмечено, что при одновременном изучении препаратов конъюнктивы и урогенитального тракта процент обнаружения цитоплазматических включений в конъюнктивальных соскобах был в 1,5 - 1,8 раза выше. Эти данные подтверждаются многими исследователями, считающими, что цитологический метод приемлем лишь при технической невозможности применения других методов, но может характеризоваться как чувствительный при экстрагенитальных хламидиозах [1, 2].

Дальнейшая наша работа была построена на внедрении и сравнительном изучении сразу трех методов: иммунофлюоресцентной микроскопии с окрашиванием хламидийных антигенов иммунофлюоресцентными красками на основе моно- и поликлональных антител; реакции непрямой гемагглютинации (РНГА) с эритроцитарным хламидийным диагностикумом; реакции непрямой иммунофлюоресценции (РНИФ) путем окрашивания антител к хламидиям иммунофлюоресцентными красителями. Для двух последних серологических исследований использовались реагенты, выпускаемые НПО "Биомед". Анализ, проведенный на основании изучения 384 сывороток от 276 больных, находящихся в разных периодах заболевания с различными клиническими проявлениями, показал, что только в первые недели острого инфекционного процесса РНГА и РНИФ наиболее информативны. В периоде реконвалесценции при длительно текущей инфекции оценка результатов анализа РНИФ становится все более субъективной, а титры антител в РНГА - низкими и монотонными.

Учитывая, что хламидийный эритроцитарный диагностикум для РНГА выявляет в сыворотке больных специфические суммарные иммуноглобулины ко всем видам хламидий и пригоден для массового скрининга хламидиозов у детей и взрослых в острый период инфекции и в ранние сроки заболевания, а в РНИФ действующим началом являются видоспецифические антигены C. psittaci и C. trachomatis, мы рекомендуем использовать эти два метода в комплексе. У пациентов с титром антител в сыворотке крови по результатам РНГА 1:160 - 1:320 и выше мы проводили исследования сыворотки в РНИФ. По нашим данным, в группе женщин с отягощенным акушерским диагнозом с высокими титрами хламидийных антител в 52,3% случаев выявлены антитела с C. trachomatis, в 4,5% - с C. psittaci, в 43,2% случаев реакция была отрицательной. Эти данные косвенно свидетельствуют о том, что серологические исследования целесообразно применять как скрининговые методы с последующим отбором пациентов с положительными серологическими маркерами для дальнейшего обследования другими методами. Наши наблюдения показали, что наиболее информативным является метод прямой иммунофлюоресценции (ПИФ), основанный на обнаружении комплексов антигена-возбудителя при взаимодействии со стандартными специфическими моноклональными антителами. Считается, что информативность метода зависит не только от качества забора материала, но и от качества диагностикумов. Мы работали с наборами "Chlamyset-antigen" фирмы "Орион-диагностика" (Финляндия), "Хламоноскрин" СП "Ниармедик" (Россия) и "ХламиСлайд" AО "Лабдиагностика" (Россия). Параллельные исследования показали высокую чувствительность отечественных диагностикумов: от 95,6 до 98,2% в разных группах больных ЗППП.

Метод ПИФ технически прост, чувствителен, воспроизводим, требует для постановки максимум 30 минут и поэтому может быть использован как метод экспресс-диагностики. Поскольку моноклональные антитела взаимодействуют с поверхностными антигенными детерминантами хламидий даже после излечения в течение 1-1,5 месяцев, до тех пор, пока полностью не сменится слизистая с разрушенными хламидийными клетками, необходимо либо проводить контрольные исследования в более поздние сроки, либо наблюдать в динамике изменение титра хламидийных антител в серологических реакциях.

Способность хламидии к персистированию, образование мембраноограниченных зон в эпителиальных клетках, низкая концентрация инфекционного агента в исследуемых образцах диктуют необходимость привлечения новых методов, в частности, молекулярно-генетических. Нами использовался метод полимеразноцепной реакции (ПЦР), в основе которого лежит выявление в исследуемых образцах фрагментов нуклеиновых кислот микроорганизмов и многократное реплицирование специфического участка нуклеотидной последовательности, катализируемой ДНК-полимеразой. Использование термостабильной ДНК-полимеразы, источником которой служат термофильные бактерии, создает возможность автоматизации синтеза нуклеиновой кислоты in vitro. Высокая чувствительность метода достигается за счет того, что в результате многократного копирования уровень специфической олигонуклеотидной последовательности в реакционной пробе возрастает в 10 6 - 10 8 раз.

При одновременном использовании методов ПЦР, ПИФ, экспресс-метода "Хламиген" (Syntron Bioresearch Inc, USA) было обследовано 80 больных с воспалительными заболеваниями урогенитального тракта, бесплодием, отягощенным акушерско-гинекологическим анамнезом. Одним или несколькими методами хламидии были выявлены у 75% больных, двумя и более методами - в 53,7% случаев, только методом ПЦР диагноз верифицирован у 15% больных. В последнюю группу вошли наиболее сложные в диагностическом плане больные, у которых при наличии характерных субъективных и объективных признаков заболевания неоднократное обследование другими методами не приводило к обнаружению возбудителя.

Применение ферментативного экспресс-теста "Хламиген" позволило выявить группу пациентов, нуждающихся в дальнейшем углубленном обследовании. Связано это с тем, что пределы детектирования составляют 1000 ед. на 1 мл и выше. Следовательно, тест "Хламиген" является дополнительным скрининговым тестом для выявления возбудителя C. trachоmatis в остром периоде инфекции.

Таким образом, изучение в динамике различных методов диагностики урогенитального хламидиоза позволило разделить их на отборочные и диагностические. К отборочным, скрининговым методам мы отнесли ферментативный экспресс-тест и серологические методы, к диагностическим - ПИФ и ПЦР. Наиболее достоверные результаты получаются при использовании обоих методов в течение двух-трех дней подряд с учетом жизненного цикла развития хламидии. Подбор методов зависит от выраженности клинических проявлений, давности и локализации процесса, а также предшествующей терапии.



Комментарии

Добавить комментарий Скрыть

Самые читаемые

Увеличение (удлинение) полового члена методом растягивания (тракционный метод) Увеличение (удлинение) полового члена методом растягивания (тракционный метод)
Дапоксетин отзывы Дапоксетин отзывы
Женщины и мужчины - основные различия Женщины и мужчины - основные различия
Вакуумный метод увеличения полового члена при помощи помпы. Вакуумный метод увеличения полового члена при помощи помпы.
Сифилис оказался чесоткой полового члена Сифилис оказался чесоткой полового члена
Самые комментируемые
© 2010 Urogid.ru - Мужское здоровье. Андрология и Урология. Мужское бесплодие. Эректильная дисфункция. Простатит. Проблемы недержания мочи. Сексуальные расстройства
При цитировании информации гиперссылка на UroGid.ru обязательна
Для связи с администрацией: misterwolgast@mail.ru icq: 321400090
Rambler's Top100